Vision色譜柱的正確使用和維護(hù)非常重要。稍有不慎就會降低柱效,縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,應(yīng)注意以下問題進(jìn)行維護(hù)Vision色譜柱。
1.避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動。溫度的突然變化或使溫度發(fā)生變化。Vision色譜柱從高處脫落會影響柱內(nèi)的填充狀態(tài);柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)的填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)緩慢進(jìn)行,閥門進(jìn)樣時閥門的旋轉(zhuǎn)不宜過慢。
2.溶劑的組成應(yīng)逐漸改變,特別是在反相色譜中,不能直接從有機溶劑改為全水,反之亦然。
3.一般說來Vision色譜柱不能反沖,只有當(dāng)生產(chǎn)者指示柱可以反沖時,才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。否則,反沖會迅速降低柱效。
4.選擇合適的流動相(尤其是pH),為了避免固定相的損壞。有時,預(yù)柱可以連接到進(jìn)樣器前面。當(dāng)分析柱與硅膠鍵合時,預(yù)柱為硅膠,使流動相在進(jìn)入分析柱前提前被硅膠覆蓋"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。
5.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品,特別是生物樣品直接注入柱中,需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和進(jìn)樣器中Vision在色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是填充相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以并且應(yīng)經(jīng)常更換。
6.經(jīng)常用強溶劑沖洗Vision色譜柱,去除柱中保留的雜質(zhì)。清洗時,流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)逐漸用混溶溶溶劑過渡,每個流動相的體積應(yīng)為柱體體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。